1 范圍
本標準適用于風化煤、褐煤、泥炭等含腐植酸原料中黃腐酸以及由上述原料制備得到的各類產品中黃腐酸的測定。同樣適用于土壤、水體以及水洗沉積物。尤其適用于腐植酸鉀、腐植酸鈉、黃腐酸鉀、黃腐酸鈉、高純黃腐酸等產品。
2 規范性引用文件
下列文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，僅注明日期的版本適用于本標準。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。
HG/T 2843 化肥產品 化學分析中常用標準滴定溶液、標準溶液、試劑溶液和指示劑溶液
GB/T 8571 復混肥料 實驗室樣品制備
GB/T 8170 數值修約規則與極限數值的表示和判定
3 方法提要
樣品經1%硫酸溶液(pH≈1)抽提，經過濾去除不溶物，得到含黃腐酸、糖類、氨基酸及其他非芳香族低分子酸的混合溶液。溶液中黃腐酸經大孔選擇性吸附樹脂吸附，其它低分子有機物不被樹脂吸附流出。被吸附的黃腐酸再用1 mol/L氫氧化鈉溶液脫附，洗脫液干燥稱重并經灼燒殘渣校正，由此得到的黃腐酸重量占試樣重量的百分比即為黃腐酸含量。
4 試劑和材料
警告—試劑中硫酸及其溶液和氫氧化鈉溶液具有腐蝕性，相關操作應在通風櫥內進行。本標準并未指出所有可能的安全問題，使用者有責任采取適當的安全和健康措施，并保證符合國家有關法規規定的條件。
本標準中所用試劑、水和溶液的配制，在未注明規格和配制方法時，均應按HG/T 2843規定執行。
4.1 試劑
4.1.1 硫酸(GB/T 629)：分析純。
4.1.2 硫酸溶液c(H2SO4)=1%：量取6.15 mL硫酸(4.1.1)，緩慢溶于1000 mL水中，搖勻。
4.1.3 氫氧化鈉(GB/T 629)：分析純。
4.1.4 氫氧化鈉溶液c(NaOH)=1 mol/L：稱取40 g氫氧化鈉(4.1.3)溶于水，于1000 mL容量瓶中定容、搖勻。
4.1.5 鹽酸(GB/T 622)：分析純。
4.1.6 鹽酸溶液c(HCl)=1 mol/L：將83.2 mL鹽酸(4.1.5)用水稀釋后，轉入1000 mL容量瓶中，定容、搖勻。
4.1.7 DAX-8/XAD-8大孔吸附樹脂(甲基丙烯酸酯樹脂)：40~60目，孔容0.79 mL/g，平均孔徑225 ?，比表面160 m2/g。
4.2 儀器設備
4.2.1 分析天平：感量0.0001 g。
4.2.2 恒溫水浴：6孔或6孔以上，控溫精度±l ℃。
4.2.3 恒溫干燥箱：溫度能控制在108±5 ℃。
4.2.4 離心機：最低轉速2000 r/min，離心杯容積大于400 mL。
4.2.5 馬弗爐：控溫精度815±10 ℃。
4.2.6 蠕動泵：BT300-1F，分配型灌裝蠕動泵。
4.2.7 分光光度計：波長范圍200~1000 nm，波長重復性0.5 nm，波長精度+1.0 nm。
4.2.8 pH計：檢測精度至0.01。
4.2.9 真空旋轉蒸發器：旋轉瓶容積1000 mL。
4.2.10 水環式真空泵：與4.2.9配套。
4.2.11 圓柱形瓷坩堝：50 mL。
4.2.12 玻璃層析柱：4 cm×25 cm
5 測定步驟
5.1 抽提
稱取按GB/T 8571制得的過80目篩的分析樣品1.0~2.0g(稱準到0.0002 g )于250 mL錐形瓶中，加入1%硫酸抽提液(4.1.2，下同)100 mL，搖動使樣品潤濕，在錐形瓶口蓋一小漏斗，置于(100士l ℃)的水浴中(溫度達不到時，加適量甘油調節)，加熱抽提1 h，每隔20 min搖動一次，使樣品均勻抽提。同時做空白試驗。
5.2 過濾
取出錐形瓶，冷卻到室溫，將抽提液及殘渣全部轉移到中速定性濾紙上過濾，用1%硫酸將殘渣轉移到濾紙上，并清洗殘渣至無色。濾液及酸洗液收集到200 mL容量瓶中，用水稀釋到刻度，搖勻，為A液，供大孔樹脂吸附分離用。
5.3 吸附
5.3.1 樹脂處理
5.3.1.1 新樹脂預處理：
用乙醇或丙酮連續洗滌數次，洗至加適量水至無白色渾濁現象，乙醇浸泡24 h，使其充分溶脹，水洗至中性，裝柱，再用蒸餾水洗至無醇味即可。
5.3.1.2 樹脂再生：
用1 mol/L鹽酸溶液、1 mol/L氫氧化鈉溶液依次浸泡，水洗中性，裝柱后用乙醇(濃度逐漸增大)沖洗，水洗脫至無醇味即可上樣。
5.3.2 吸附
5.3.2.1 取50 mL由5.2得到的A液，用蠕動泵低壓打到DAX-8層析柱頂部，緩緩流過樹脂，流速控制在1～3 mL/min。
5.3.2.2 層析柱用1%硫酸溶液清洗，直到流出水的吸光度與新鮮1%硫酸溶液在350 nm處的吸光度一致，用1%硫酸溶液校準分光光度計的零點。
5.4 脫附
蠕動泵將1%氫氧化鈉溶液打到DAX-8/XAD-8層析柱頂部，緩緩流過樹脂，流速控制在1～3 mL/min。將已吸附的黃腐酸洗脫下來，直到洗脫液在350 nm處的吸光度與新鮮1% NaOH溶液的吸光度一致。同樣，用1% NaOH溶液校準分光光度計的零點，洗脫液為B液。
5.5 洗脫液濃縮與干燥
洗脫液B液置于旋轉蒸發器內濃縮至約15~20 mL，將濃縮液全部轉移至預先恒重并稱重的50 mL圓柱型瓷坩堝(4.2.11)中，于105~110℃干燥箱中干燥2 h。取出，先在空氣中冷卻2~3 min，然后放入干燥器中冷卻至室溫(約20 min)，稱量。檢查性干燥，直至連續兩次的差值不大于0.001 g，計算黃腐酸干燥的重量(G1)，同時稱重并計算空白干燥的重量(G3)。
5.6 灼燒
將5.5干燥恒重過的沉淀物連同圓柱型瓷坩堝置于馬弗爐內，從室溫緩慢升溫至600 ℃，升溫速率為10 ℃/min，在600士10 ℃下灼燒1 h。取出后在空氣中冷卻5 min，再放入干燥器中冷卻至室溫(約20 min)后稱重。進行檢查性灼燒，直至連續兩次的差值不大于0.001 g。計算黃腐酸灼燒殘渣的重量(G2)及空白灼燒殘渣的重量(G4)。
6 結果計算
分析試樣中的黃腐酸含量(FAad)以重量百分數(%)表示，按下式計算：
式中：
G----試樣重量，g；
G1----黃腐酸干燥的重量，g；
G2----干燥黃腐酸灼燒殘渣的重量，g；
G3----空白干燥的重量，g；
G4----干燥空白灼燒殘渣的重量，g；
V ----A溶液的體積，mL；
V1----測定時所取A溶液的體積，mL。
7 允許差
表1
| FAad/% | 同一化驗室/ad% | 不同化驗室/ad% |
<5.0 ≥5.0 | 0.00 0.08 | 0.08 0.15 |
8 注意事項
8.1 旋轉蒸發器中的濃縮液轉移至坩堝中時操作應十分小心，小心洗滌旋轉瓶內壁，避免損失。
8.2 洗脫層析柱吸附的黃腐酸時，樣品和空白試驗中氫氧化鈉洗滌液用量及洗滌次數應保持一致。
8.3 再生后的樹脂如無法恢復白色，呈淡黃色時，需使用新鮮洗液浸泡8~10 h，水洗至中性再使用。
