B.1 方法原理
用焦磷酸鈉堿液從樣品中抽提腐植酸，再在強酸性溶液中用重鉻酸鉀將腐植酸中的碳氧化成二氧化碳，根據重鉻酸鉀消耗量和腐植酸的碳系數，計算肥料中腐植酸的含量。
主要反應為：
C(HA)+K2Cr2O7+H2SO4→Cr2(SO4)3+K2SO4+CO2↑+H2O
K2Cr2O7(過剩)+Fe2++4SO42-→Cr2(SO4)3 +K2SO4+Fe3+
B.2 儀器和設備
實驗室常用儀器和恒溫水浴。
B.3 試劑和溶液
分析時除非另有說明，限用分析純試劑、蒸餾水或相當純度的水。
B.3.1 焦磷酸鈉堿抽提液
稱取15 g化學純焦磷酸鈉(Na2P4O7?10H2O)(HG 3-1288)和7 g氫氧化鈉(GB/T 629)，溶解到1 L蒸餾水中，密閉保存。
B.3.2 重鉻酸鉀(GB 1259-77)標準溶液[c(1/6 K2Cr2O7)=0.1 mol/L)]
將重鉻酸鉀于130 ℃烘3 h，在干燥器中冷卻至室溫，稱取4.9036 g于燒杯中，加水溶解，然后轉移至1000 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻；也可以直接用買來的重鉻酸鉀基準試劑，按其說明來配制。
B.3.3 重鉻酸鉀(GB 642-77)溶液[c(1/6 K2Cr2O7)=0.4 mol/L)]
稱取20 g重鉻酸鉀溶于1000 mL水中，貯存于細口瓶中待用。
B.3.4 硫酸(GB 625-77)
分析純，98％。
B.3.5 鄰菲羅啉(GB 1293-77)指示劑
稱取1.5 g鄰菲羅啉和1 g硫酸亞鐵溶于100 mL水中，貯存于棕色瓶中。
B.3.6 硫酸亞鐵銨(GB 661-77)標準溶液[c(Fe2+)=0.1 mol/L]
稱取40 g六水硫酸亞鐵銨溶于適量的水中，加入20 mL濃硫酸，用水稀釋至1000 mL，搖勻，裝入深色瓶中，放入兩條潔凈的鋁片或電纜鋁線，以保持溶液濃度長期穩定，避免經常標定。按下述方法標定溶液的濃度：
準確吸取c(1/6 K2Cr2O7)= 0.1 mol/L重鉻酸鉀標準溶液25 mL于250 mL錐形瓶中，加入70～80 mL水和10 mL濃硫酸，冷卻后加3滴鄰菲羅啉指示劑，用待標定的硫酸亞鐵銨溶液滴定，直至溶液顏色變為磚紅色即為終點。
硫酸亞鐵銨標準溶液的濃度(M)以mol/L表示，按下式計算：
式中：V—滴定時消耗硫酸亞鐵銨溶液體積，mL。
B.4 測定步驟
B.4.1 溶解
稱取0.6±0.01 g(準確至0.0002 g)分析樣品于250 mL錐形瓶中，加入焦磷酸鈉堿液100 mL，搖動使樣品潤濕，于瓶口插一小玻璃漏斗，置于100±5 ℃的水浴中，加熱抽提2 h，每隔0.5 h搖動1次，使樣品全部沉下。取出錐形瓶，冷卻后將溶液及殘渣全部轉入200 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用中速定性濾紙干過濾，棄去最初的約10 mL，隨后濾出50～100 mL溶液，供測定用。
B.4.2 氧化
準確吸取干過濾液5.0 mL于250 mL錐形瓶中，加入c(1/6 K2Cr2O7)=0.4 mol/L重鉻酸鉀溶液5 mL，緩慢加入濃硫酸15 mL，于沸水浴中加熱氧化30 min。
B.4.3 滴定
將氧化后的溶液從水浴中取下，冷卻至室溫，加入約70 mL水，3滴鄰菲羅啉指示劑，用硫酸亞鐵銨標準溶液滴定，溶液由橙色經綠色變為磚紅色即為終點。
B.4.4 空白測定
按照上述步驟進行空白試驗。
B.5 結果計算
樣品中總腐植酸含量HAt，d(干基)以質量百分數(％)表示，按下式計算：
HAt，ad (分析基)= 
HAt， d (干基)= HAt，ad/(1-Mad)
式中：
V0—滴定空白所消耗的硫酸亞鐵銨溶液的體積，mL；
V1—滴定樣品腐植酸所消耗的硫酸亞鐵銨溶液的體積，mL；
M—硫酸亞鐵銨標準溶液的濃度，mol/L；
0.003—與1.00 mL c(Fe2+)=1.000 mol/L硫酸亞鐵銨溶液相當的碳質量，g；
a—試樣溶液的總體積，mL；
b—測定時所取試樣溶液的體積，mL；
G—樣品的重量，g；
C—不同樣品純腐植酸碳系數，風化煤腐植酸O.64，褐煤腐植酸0.58，泥炭腐植酸0.51，生物質腐植酸0.50；
Mad—樣品的水分。
B.6 允許差
測定結果的允許差值應符合附表B-1規定。
附表 B-1
B.7 注意事項
(1) 若樣品中腐植酸含量超過50％，可考慮使用c(1/6 K2Cr2O7)=0.8 mol/L的重鉻酸鉀溶液氧化。
(2) 鄰菲羅啉可用2-羧基代二苯胺(鄰苯胺基苯甲酸，OBAC)代替。稱取研細的OBAC 0.23 g，加入12 mL 0.1 mol/L氫氧化鈉溶液，于沸水浴中加熱溶解，用蒸餾水稀釋至250 mL。
(3) 本方法只測定腐植酸總量，不能分別測出棕腐酸和黃腐酸。
